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ELISA試劑盒直銷(xiāo)應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中植物酯酶水平。用純化的植物酯酶抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入酯酶,再與HRP標(biāo)記的酯酶抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。
ELISA試劑盒直銷(xiāo)在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的,顏色的深淺和樣品中的植物酯酶呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中植物酯酶濃度。采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的活性。
ELISA試劑盒直銷(xiāo)分別設(shè)空白孔標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍),加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。植物ELISA試劑盒廠家上海直銷(xiāo)用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
ELISA試劑盒直銷(xiāo)以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù)。ELISA試劑盒直銷(xiāo)或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。