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ELISA試劑盒規(guī)范品溶解與稀釋的正確過(guò)程ELISA規(guī)范品溶解與稀釋的正確過(guò)程:
1. 粉末規(guī)范品時(shí)間短離心,讓因運(yùn)送沾到管蓋、管壁的規(guī)范品沉到管底。
2. 依據(jù)瓶標(biāo)簽參加必定體積的蒸餾水,加水后輕柔渦旋震動(dòng),室溫靜置溶解 10-30min,讓粉末*溶解。留意:加水后暫不必移液槍吹吸,防止蛋白未溶解,槍頭帶出部分蛋白,待*溶解后可吹吸或渦旋振動(dòng)混勻。
3. 規(guī)范品梯度稀釋:(1)耗材預(yù)備:預(yù)備8個(gè)1.5Ml離心管,寫上S1-S7、空白。(2)規(guī)范品稀釋液的挑選:若血清、血漿、安排勻漿樣本,用試劑盒中的規(guī)范品稀釋液,梯度稀釋規(guī)范品。若細(xì)胞上清樣本,主張用細(xì)胞培養(yǎng)基梯度稀釋規(guī)范品。(3)梯度稀釋:依據(jù)說(shuō)明書,每管參加等體積的規(guī)范品稀釋液(培養(yǎng)基)。汲取同體積溶解好的規(guī)范品到S1管中,吹打10次混勻,渦旋5S。從S1管中汲取同體積溶液到 S2管,吹打10次混勻,渦旋5s。同法稀釋S3-S7濃度。
(4)空白: ELISA試劑盒規(guī)范品稀釋液(培養(yǎng)基)作為空白即零濃度。留意:梯度稀釋規(guī)范品時(shí),渦旋震動(dòng)混勻后可時(shí)間短離心,讓到蓋子、壁上的液體到管底,再開(kāi)始稀釋下個(gè)濃度。規(guī)范品溶解、梯度稀釋是ELISA試驗(yàn)要害點(diǎn),按以上辦法梯度稀釋就可!