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    胎牛血清運(yùn)用中遇到的常見問題

    發(fā)布時間: 2019-04-30  點(diǎn)擊次數(shù): 1536次

    1、 怎樣貯存和凍結(jié)血清才不會使產(chǎn)質(zhì)量量受損?
    將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須留意的是,融解過程中必須規(guī)矩地?fù)u晃均勻。長時間貯存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)或許集合而形成沉積或可見的混濁。因而,推薦在-20℃以下貯存血清,并防止反復(fù)凍融。
    咱們主張血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時,請勿超越一個月。若一次無法用完一瓶,主張無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。

    2、血清中包括絮狀沉積,它們是什么,怎樣處理?
    沉積包括纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除掉沉積,離心血清(400g,1-2分鐘)或許簡略的讓其沉積在瓶子底部,將血清當(dāng)心的轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶里(一般不主張采用過濾的方法除掉沉積,因?yàn)槌练e會堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況悄悄搖擺沉積并加熱至37℃就會再溶解。所以,運(yùn)用產(chǎn)品時要搖擺并加熱血清至37℃,沉積會自然消失。

    3、實(shí)驗(yàn)室怎樣選擇適合的血清?
    國內(nèi)一致以為HYCLONE的血清是好的,可是依據(jù)我在北美的閱歷,國外一般以為GIBCO比HYCLONE好,所以并不是價格決定質(zhì)量,可是總的來說這兩種價格普遍偏貴,一般不是太嬌氣的細(xì)胞,國產(chǎn)的就夠用了。此外,因?yàn)閲鴥?nèi)HYCLONE,GIBCO并沒有生產(chǎn)線,咱們只能從代理商那里買,而代理商又魚龍混雜,所以買到假貨的或許性也很大。所以,我一般會從直銷員那里買血清,有的國外生物公司因?yàn)閯倓傔M(jìn)入我國,度不高,可是其實(shí)在國外現(xiàn)已做得很不錯了,如Wisent等,他們在國內(nèi)有辦事處,我會從那里拿,血清的質(zhì)量和HYCLONE平起平坐,但價格相對優(yōu)惠很多。

    4、 怎樣防止血清中發(fā)生沉積?
    按如下操作可防止沉積的發(fā)生:
    (1)凍結(jié)血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉積的發(fā)生。
    (2) 血清分裝凍存時,須規(guī)矩?fù)u晃均勻(當(dāng)心勿形成氣泡),使溫度與成分均一。
    (3) 勿直接由-20℃直接至37℃凍結(jié),因溫度改變太大,簡單形成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉積。
    (4) 勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得污濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因而受到破壞,然后影響血清的質(zhì)量。
    (5) 血清的熱滅活十分簡單形成沉積物的增多,若非必要,可以無須做此過程。
    (6) 若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的準(zhǔn)則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會形成沉積物的增多。

    5、小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與留意事項(xiàng)?
    來歷不同:胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。

    組份與份額不同:兩者所含的促細(xì)胞成長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組份與份額不同,用途與用法不同:某些細(xì)胞必需胎牛血清才能成長,而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,運(yùn)用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。
    血清保存和運(yùn)用須留意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不行超越一個月。凍結(jié)血清時 ,應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱,并經(jīng)常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,不行將冷凍的血清直接放入37℃水浴或許溫箱中,如放在37℃凍結(jié),色彩加深,粘稠度也會添加,血清在凍結(jié)和熱滅活后,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,防止反復(fù)凍融。

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