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把握了試驗(yàn)技巧之后,人ELISA試劑盒試驗(yàn)入門(mén)新手學(xué)起來(lái)都會(huì)快的多。本篇文章中的小竅門(mén)包含了要求、辦法等技術(shù),為大家整理出了這些個(gè)人ELISA試劑盒小竅門(mén):
1.加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
2.合理安排檢丈量,以免反響板過(guò)多造成洗板等待時(shí)刻長(zhǎng)。
3.汲取液體時(shí),要用量程和需求量接近的槍去吸,減少差錯(cuò)。
4.要盡量做雙孔試驗(yàn),這樣才既能保證數(shù)據(jù)的性,又能反映出試劑盒的精密度。
5.樣品稀釋液運(yùn)用加液器加注,并經(jīng)常校正其性。
6.為避免樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反響板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
7.未運(yùn)用完的酶標(biāo)板或者試劑,請(qǐng)于2-8℃保存。辣根過(guò)氧化物酶符號(hào)抗人IgG工作液請(qǐng)根據(jù)所需的量裝備運(yùn)用。請(qǐng)勿重復(fù)運(yùn)用已稀釋過(guò)的辣根過(guò)氧化物酶符號(hào)抗人IgG工作液。
8.ELISA試劑盒試驗(yàn)中,加樣后及時(shí)放人孵箱,標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)刻,避免孵育時(shí)刻人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反響孔周?chē)?,難以清洗*。
9.剩下樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
10.人ELISA試劑盒洗刷時(shí)各孔均需加滿液體,避免孔口有游離酶不能洗凈。
11.每次試驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。丈量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。
12.手藝洗板時(shí)每次加入洗刷液后。應(yīng)靜置15~30s,不要將一個(gè)酶標(biāo)孑L中的洗刷液濺入另一酶標(biāo)孔中,避免穿插污染。甩去洗刷液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。
13.對(duì)樣本的結(jié)果有疑問(wèn)時(shí)需求運(yùn)用其他檢測(cè)辦法進(jìn)行驗(yàn)證。
14.沒(méi)有去離子水或雙蒸水時(shí),能夠運(yùn)用娃哈哈純凈水制造溶液,切勿運(yùn)用自來(lái)水。
15.在運(yùn)用微量加樣器時(shí),汲取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使汲取標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
16.汲取液體時(shí)速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,人ELISA試劑盒汲取的量不夠。
17.汲取液體時(shí)要選用量程和需求量接近的微量加樣器吸,減少差錯(cuò)。