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在培育原代細胞時為了促進原代細胞貼壁需要對使用的T-25/T-75等耗材進行包被處理,常用的包液有多聚賴氨酸和纖維黏連蛋白、明膠,其中ScienCell研討實驗室研發(fā)的包被液就包含上述3種產(chǎn)品。
其中包被液多聚賴氨酸是一種合成化合物,是帶正電荷的氨基酸,通過改變培育基質(zhì)外表的電極來促進細胞貼壁。在細胞培育中廣泛用于包被物促進細胞貼壁。除了促進細胞貼壁成長,包被液多聚賴氨酸包被后能提高原代細胞的存活率和促進神經(jīng)突長出。
Sciencell出售的包被液多聚賴氨酸是原液,分子量是70000~150000。包被液多聚賴氨酸以1-2 ug/cm2的濃度包被培育瓶。可將1mg/ml的包被液多聚賴氨酸以滅菌雙蒸水稀釋100倍,T-75培育瓶中加入10ml左右,37度孵箱1小時或4度冰箱過夜,用包被液包被好的培育瓶不要放置超越24小時,包被液可重復使用2-3次,留意不要污染。
包被液纖維粘連蛋白是分子量為440-500kDa的糖蛋白,存在于細胞外表蛋白和血漿中。它于細胞膜外表受體和細胞外基質(zhì)成分結(jié)合。ScienCell實驗室的包被液牛血漿纖維粘連蛋白使用親和色譜法提純自牛血漿,是促進細胞貼壁和延伸成長的理想基質(zhì)。引薦包被濃度是2 μg/cm2。假如想到達jia效果取決于細胞類型。
包被液明膠是來自于膠原的高分子量水溶蛋白混合物。0.2%的包被液明膠溶液用于包被培育器皿以促進細胞貼壁。引薦用于分化的人胚胎干細胞,某些原代細胞和永生化細胞。