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國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒試驗(yàn)科研者們往往對(duì)成果zui為重視,而因而忽略了細(xì)節(jié)問題,但成果取決于細(xì)節(jié)!
1.疏水性聚脂布作為載體;
2.聚苯乙烯微量板為載體;
3.硝酸纖維膜為載體。
是將酶催化的放大作用與特異性抗原抗體反響結(jié)合起來的一種微量分析技術(shù)。酶符號(hào)抗原或抗體以后,既不影響抗原抗體反響的特異性,也不改動(dòng)酶本身 的活性。由于ELISA試劑盒價(jià)格低廉且準(zhǔn)確性搞、反響時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn),所以合適大批量的檢測(cè),一般常常用于食品安全檢測(cè)方面。
◆ELISA試劑盒需求遵從的幾個(gè)細(xì)節(jié)關(guān)鍵:
1.抗原或抗體能吸附于固相載體外表,并堅(jiān)持其免疫學(xué)活性;
2.抗原或抗體可通過共價(jià)鍵與酶銜接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能堅(jiān)持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;
3.酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)參加底物的色彩反響來斷定是否有免疫反響的存在,并且色彩反響的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,可根據(jù)已知濃度的抗原或抗體的色彩反響的深淺制作規(guī)范曲線并依此計(jì)算出不知道樣品中抗體或抗原的濃度。
◆國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒注意事項(xiàng):
1、標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽性反響。保存過久可發(fā)作聚合在ELISA中可使本底加深。
2、凍住標(biāo)本溶解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,散布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛混合,不要在混勻器上激烈震蕩。
3、污濁或有沉積的標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾,弄清后再檢測(cè)。
4、反復(fù)凍融會(huì)使蛋白效價(jià)下降,所以代測(cè)樣本如需保存作多次檢測(cè),宜少量分裝冰存。