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洗刷是實驗操作進程中看似很簡單但又至關重要的一個進程,所以今日我司給一些建議和輔導來給你們廣泛一下生物試劑這方面小常識。一同來看看吧!
1. 自動洗板機:每孔參與洗刷液350μl,注入與吸出距離60秒。洗板5次。
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2. 手藝洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗刷液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
生物試劑實驗初步前,各試劑均應平衡至室溫;試劑或樣品制造時,均需充沛混勻,并盡量避免起泡。
1.加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,留意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,悄然晃動混勻。給酶標板覆膜,37℃孵育2小時。為確保實驗結(jié)果有效性,每次實驗請運用新的標準品溶液。
2.棄去液體,甩干,每個孔中參與Detection Ab工作液 100μl(在運用前15分鐘內(nèi)制造),酶標板加上覆膜,37℃溫育1小時。
3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)制造)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。
5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同進程3。
6.每孔加底物溶液100μl,酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實踐顯況酌情縮短或延伸,但不可超過30分鐘。當標準孔呈現(xiàn)明顯梯度時,即可中止)。
7.每孔加中止液50μl,中止反響,此時藍色立轉(zhuǎn)。中止液的參與次第應盡量與底物液的參與次第相同。
8.生物試劑立即用酶標儀在450nm波長丈量各孔的光密度(OD值)。應提早翻開酶標儀電源,預熱儀器,設置好檢測程序。
9.實驗結(jié)束后將未用完的試劑按規(guī)則的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。