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1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量測(cè)定的文章使得1966年開(kāi)始用于抗原定位的酶標(biāo)抗體技術(shù)發(fā)展成液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測(cè)定方法。
應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)水平。用純化的待測(cè)物質(zhì)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入待測(cè)物質(zhì),再與HRP標(biāo)記的待測(cè)物質(zhì)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,ELISA試劑盒經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中待測(cè)物質(zhì)濃度。
BA-ELISA分為:
1,LAB法即酶聯(lián)親和素-生物素標(biāo)記法(Labeledavidin-biotin,簡(jiǎn)稱(chēng)LAB)。用辣根過(guò)氧化物酶直接標(biāo)記親和素,用生物素標(biāo)記第二抗體。
2,ABC法即酶聯(lián)親和素-生物素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物法(Avidin-Biotin-PeroxidaseComplex,簡(jiǎn)稱(chēng)ABC)。如用鏈霉親和素(Streptavidin),則形成鏈霉親和素-酶聯(lián)生物素復(fù)合物(Streptavidin-Biotin-PeroxidaesComplex,簡(jiǎn)稱(chēng)SABC)。在ABC法中,用生物素標(biāo)記第二抗體,ELISA試劑盒又用生物素標(biāo)記過(guò)氧化物酶。在使用前30min,親和素與酶聯(lián)生物素以1:1的比例混勻。1個(gè)親和素分子結(jié)合3個(gè)生物素分子,親和素剩下的1個(gè)結(jié)合點(diǎn)與標(biāo)記第二抗體的生物素結(jié)合,親和素起橋聯(lián)作用。ABC法比PAP(Peroxidase-antiperoxidasetech-nique)法敏感幾十倍。
3,BAB法即酶聯(lián)親和素-生物素橋法(Bridgedavidin-biotin,簡(jiǎn)稱(chēng)BAB)。用游離親和素(或鏈霉親和素)作為橋聯(lián)劑,將生物素標(biāo)記后開(kāi)成的復(fù)合物與酶標(biāo)記生物素連結(jié)起來(lái),然后進(jìn)行樣品的檢測(cè)。由于標(biāo)記抗體分子上連有多個(gè)生物素,因此,ELISA試劑盒zui終形成的抗原-生物素標(biāo)記抗體-親和素-酶標(biāo)生物素復(fù)合物可積聚大量的酶分子;加入相應(yīng)底物后,產(chǎn)生強(qiáng)烈的酶促反應(yīng),大幅度提高檢測(cè)的靈敏度。
Human IL-17 Quantikine ELISA Kit D1700 1 Kit
Human IGFBP-2 DuoSet DY674 1 Kit (15塊板)
Clear Polystyrene Microplates, 25 Pack
High Binding; Flat Bottom; 360 uL Well Volume; 12-1x8 Well Strips with Frame ,DY990,1 Pack. (25微孔板)
Human IGF-I R DuoSet, 15 Plate ,DY391 ,1 Kit.
Human IL-18 Quantikine ELISA Kit 1 Kit
Human VEGF-C Quantikine ELISA Kit DVEC00 1 Kit
Human VEGF Quantikine ELISA Kit DVE00 1 Kit
Human Follistatin Quantikine ELISA Kit DFN00 1 Kit
Human TIMP-1 Quantikine ELISA Kit DTM100
Human MMP-2 Quantikine ELISA Kit DMP2F0
Human IL-1F7/FIL1 zeta DuoSet, 15 Plate DY1975 1 Kit
Human IL-18/IL-1F4 ELISA 7620 1 Kit
Human IL-1F7/FIL1 zeta DuoSet, 15 Plate DY1975 1 Kit
Human TIMP-1 Quantikine ELISA Kit ELISA試劑盒 DTM100 1 Kit
Human MMP-9 Quantikine ELISA Kit DMP900 1 Kit
Recombinant Human IL-27 2526-IL-010 10 μg Please Inquire
Recombinant Human IL-27, CF 2526-IL-010/CF 10 μg Please Inquire
Recombinant Rat GFR alpha-1 Fc Chimera 560-GR-100 100 μg